猪IFN-γ基因的融合表达及其表达产物的生物学特性

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：h135zy

【摘要】

：

依照猪IFN-γ（pIFN-γ）成熟蛋白基因序列设计引物，将已扩增的plFN-γ基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中，构建了GST-pIFN-γ融合表达载体，该载体转化宿主菌BL21后用IPTG进行诱导表

【作者】

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窦永喜翟军军李健潘晓梅景志忠才学鹏

【机构】

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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

【出处】

：

中国兽医科学

【发表日期】

：

2008年6期

【关键词】

：

猪 IFN-Γ基因融合表达蛋白纯化生物学活性 swine IFN-γ gene fusion expression protein purifi

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划（863）项目（2006AA10A207）,甘肃省重大科技专项（ZGS063-A43-013）

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依照猪IFN-γ（pIFN-γ）成熟蛋白基因序列设计引物，将已扩增的plFN-γ基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中，构建了GST-pIFN-γ融合表达载体，该载体转化宿主菌BL21后用IPTG进行诱导表达并对诱导表达条件进行了筛选和优化，筛选出最佳诱导表达条件后大量诱导表达，可溶性的表达产物经GST琼脂糖凝胶亲和纯化；包涵体经DOC洗涤、SKL变性溶解、透析复性进行纯化。经SDS-PAGE和Westernblot分析，证实得到了高纯度的融合蛋白，该蛋白的分子质量为42ku。选择FMDV和PRV两种

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