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通过直接在大肠杆菌碱裂解上清中加入十六烷基三甲基溴化铵(CTAB),优化CTAB与质粒DNA量的比例、质粒DNA选择性释放溶液的选择和TritonX-114的使用,建立了简单、易行的大规模质粒DNA纯化工艺。纯化质粒DNA的质量检测结果显示,CTAB纯化的质粒DNA无菌体RNA污染,菌体基因组DNA、内毒素和蛋白含量分别小于100ng/mg、50EU/mg和10μg/mg质粒DNA,OD260/OD280比值介于1.75~1.85之间,超螺旋质粒DNA的比例大于80%,该工艺纯化的质粒DNA能达到或接近FDA规定的人用质粒DNA的各项指标,整个过程不使用动物源性酶和苯酚、氯仿、无水乙醇等有毒或易燃、易爆试剂,成本低廉,工艺环保。