【摘 要】
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目的：获得尘螨变应原第6组分Der f 6原核表达产物并检测其与尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体IgE结合率。方法：酶切质粒p ET28a（＋）-Der f 6获得目的基因Der f 6,将其与p ET32a（＋）载体连接
【机 构】
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东南大学医学院附属盐城医院检验科,江苏盐城卫生职业技术学院
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目的：获得尘螨变应原第6组分Der f 6原核表达产物并检测其与尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体IgE结合率。方法：酶切质粒p ET28a（＋）-Der f 6获得目的基因Der f 6,将其与p ET32a（＋）载体连接成质粒p ET32a（＋）-Der f 6,转化BL21细菌后,用异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达,用Ni＋离子亲和层析柱纯化表达产物,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、免疫印迹实验（Western blot）和蛋白质串联质谱（MALDI-TOF/TOF）鉴定纯化
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