【摘 要】
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【目的】了解Nestin在小鼠正常和损伤心脏组织中的表达及分布特征,探讨Nestin能否作为心肌干细胞的标志物。【方法】通过倒置荧光显微镜观察、RT-PCR和实时荧光定量PCR检测,
【机 构】
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中山大学附属第三医院心血管内科,中山大学干细胞与组织工程研究中心
【基金项目】
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广东省科技计划项目(2011B031800125)
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【目的】了解Nestin在小鼠正常和损伤心脏组织中的表达及分布特征,探讨Nestin能否作为心肌干细胞的标志物。【方法】通过倒置荧光显微镜观察、RT-PCR和实时荧光定量PCR检测,分析Nestin在胚胎期13.5 d、出生后1 d、7 d、1月、3月的Nestin-GFP转基因小鼠心脏组织中的表达情况;建立小鼠心肌梗死模型,观察损伤后心肌组织中Nestin的表达情况;利用免疫荧光染色法检测小鼠心脏组织中Nestin与多种干细胞标记物的共表达关系。【结果】胚胎13.5 d Nestin表达主要集中于大脑、脊髓、视网膜等部位,但在心脏组织中也可观察到Nestin的绿色荧光,小鼠出生后Nestin的表达随着小鼠年龄的增加而逐渐减少,并且RT-PCR、Q-PCR的结果显示Nestin表达同样呈递减趋势。在梗死部位的心肌组织中可见Nestin阳性的细胞较正常组织显著增多。可见Sca-1、c-kit、Isl-1、Nkx2.5在心肌组织中广泛表达,但是未与Nestin共表达,而Nestin在正常与损伤组织均可与musashi-1、vimentin共表达。【结论】Nestin与心脏发育成熟有密切的关系,可能为神经外胚层来源的一类心肌干细胞。
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