产单核细胞李斯特菌actA基因在大肠杆菌中的表达及其单克隆抗体的研制

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mdjpos01

【摘要】

：

利用PCR技术从血清型1／2a的产单核细胞李斯特菌Lm-4株中扩增出actA基因，经克隆筛选和测序鉴定后，构建成该基因的原核表达载体pGEX-6P-1-actA及pET-actA，转入E．coli后，IPTG诱导目的

【作者】

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殷月兰董慧焦新安焦红梅顾志强袁舟张晨菊征超峰

【机构】

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扬州大学生物科学与技术学院

【出处】

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微生物学报

【发表日期】

：

2006年6期

【关键词】

：

产单核细胞李斯特菌 actA基因表达单克隆抗体 Listeria monocytogenes actA gene Expression Monoclo

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30425031）,国家“973项目”（2006CB504400）,教育部TRAP0YT（175）,扬州大学科学基金项目（0K0313105）

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利用PCR技术从血清型1／2a的产单核细胞李斯特菌Lm-4株中扩增出actA基因，经克隆筛选和测序鉴定后，构建成该基因的原核表达载体pGEX-6P-1-actA及pET-actA，转入E．coli后，IPTG诱导目的蛋白的表达。SDS-PAGE结果表明，actA基因在两种载体中均获得表达，融合蛋白的大小分别约为120kDa和97kDa。以纯化蛋白为材料进行了AetA单抗的研制，获得4株抗ActA的单克隆抗体杂交瘤细胞株，腹水单抗ELISA效价为1：5×10^4-1：1×10^5。选取单

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