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目的:建立以反相高效液相色谱法测定两性霉素B血药浓度的方法.方法:色谱柱为C18,流动相为0.005mol/L乙二胺四乙酸二钠-甲醇(3:7),流速为1.0ml/min,检测波长为380nm.结果:两性霉素B检测浓度线性范围为0.125～4.0μg/ml(r=0.9 998),高、中、低3种浓度的平均回收率为93.5%,日内和日间RSD均小于3.6%.结论:本方法简便、快速、专属性强、重现性好,适用于临床两性霉素B血药浓度的监测.