目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)在甲苯二异氰酸酯(TDI)诱导人支气管上皮细胞(HBECs)中核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族含热蛋白结构域蛋白3(NLRP3)炎症小体活化中的作用.方法 (1)TDI-人血清白蛋白(HSA)刺激实验:将对数生长期HBECs随机分为对照组和低、中、高剂量组,分别予剂量为0.00、40.00、80.00、120.00 mg/L的TDI-HSA偶联物处理12 h.(2)HMGB1表达抑制实验:将对数生长期HBECs随机分为对照组、TDI-HSA处理组、TDI-HSA+阴性-siRNA组和TDI-HSA+HMGB1-siRNA组,TDI-HSA+阴性-siRNA组和TDI-HSA+HMGB1-siRNA组细胞分别利用携带阴性-siRNA慢病毒和携带HMGB1-siRNA慢病毒感染后,与TDI-HSA处理组细胞均予剂量为120.00 mg/L的TDI-HSA处理12 h,对照组细胞不予TDI-HSA处理.(3)各组细胞采用蛋白质印迹法检测HMGB1、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-1)前体(pro-caspase-1)和caspase-1 p20蛋白表达,以免疫荧光法观察TDI-HSA刺激实验中NLRP3和caspase-1炎症小体数量.结果 (1)TDI-HSA刺激实验:中、高剂量组HBECs中HMGB1和ASC蛋白相对表达水平均高于对照组(P值均<0.01);3个剂量组HBECs中NLPR3-casepase-1 p20蛋白相对表达水平和NLRP3-caspase-1炎症小体计数均高于对照组(P值均<0.01);随着TDI-HSA染毒剂量的升高,HBECs中NLRP3-caspase-1炎症小体计数增加(P值均<0.01).(2)HMGB1表达抑制实验:TDI-HSA处理组和TDI-HSA+阴性-siRNA组HBECs中HMGB1、NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1 p20的蛋白相对表达水平均高于对照组(P值均<0.01);TDI-HSA+HMGB1-siRNA组HBECs中上述指标均低于TDI-HSA处理组和TDI-HSA+阴性-siRNA组(P值均<0.01).结论 TDI处理HBECs可诱导HMGB1蛋白表达增加,活化NLPR3炎症小体;抑制HMGB1表达可下调NLPR3及其相关蛋白的表达.