紫藤脉花叶病毒cp基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

来源 :中国病毒学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：vampirewoo

【摘要】

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采用RT-PCR方法自紫藤脉花叶病毒北京分离物(WVMV-BJ)的基因组中分离出其CP基因,连接到原核表达载体pET22b(+)上.获得的重组子pET-WVMVCP转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG进行

【作者】

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梁文星宋丽敏黄金光田国忠李怀方范在丰

【机构】

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中国农业大学植物病理系,中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所

【出处】

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中国病毒学

【发表日期】

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2004年3期

【关键词】

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紫藤脉花叶病毒外壳蛋白原核表达抗血清 ELISA Wisteria vein mosaic virus CP Prokaryotic expression

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采用RT-PCR方法自紫藤脉花叶病毒北京分离物(WVMV-BJ)的基因组中分离出其CP基因,连接到原核表达载体pET22b(+)上.获得的重组子pET-WVMVCP转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE和Western blot分析表明,cp基因在大肠杆菌中获得了高效表达,融合蛋白分子量约为34.4 kDa.将融合蛋白纯化后免疫兔子,获得了特异性较高的抗血清.微量免疫沉淀法测定该抗血清的效价为1/1024,酶联法(enzyme-linkedimmunosorbant a

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