葎草花粉cDNA表达文库的构建和初步鉴定

来源 :西安交通大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zdnumber
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目的 构建蓓草花粉cDNA表达文库,为进一步筛选蓓草花粉的主要致敏蛋白组分、制备重组变应原奠定基础。方法 采集新鲜葎草花粉,过筛后液氮保存,利用Trizol法抽提葎草花粉总RNA,纯化后PCR法反转录合成cDNA。经SfiⅠ酶切,过凝胶柱层析,去除小于400 bp的片断,收集大于400bp的cDNA片段,加工后与XTripIEx2连接,文库体外包装,取出一小部分感染宿主菌XL1-Blue MRF,检测文库容量;PCR分析插入的cDNA片段的大小及多样性。结果 成功构建一个含有5X10^5重组子的蓓草花粉表
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