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目的：构建结核分枝杆菌Ag85B与白细胞介素2（IL-2）双顺反子真核表达质粒。方法：以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板，通过PCR扩增出Ag85B基因。采用亚克隆的技术从pcDNA3．1-IL-2中获得小鼠IL-2基因的cDNA片段。将两者分别定向插入真核双表达载体pIRES，构建表达两个目基因的双顺反子重组质粒，然后用脂质体包裹体外转染A。细胞，RT—PCR检测Ag85B及IL-2的表达。结果：酶切分析及序列测定证实重组质粒构建正确；该重组质粒能在体外表达Ag85B及IL-2mRNA。结论：成功构