【摘 要】
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目的:构建在哺乳动物细胞中表达的-Omi/HtrA2基因融合表达载体,为后续研究Omi/HtrA2基因过表达对结肠癌细胞HT29的影响奠定基础。方法:PCR扩增HtrA2基因编码框,用KpnI和BamHI
【基金项目】
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山东省高等学校科技计划项目(J15LE52)
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目的:构建在哺乳动物细胞中表达的-Omi/HtrA2基因融合表达载体,为后续研究Omi/HtrA2基因过表达对结肠癌细胞HT29的影响奠定基础。方法:PCR扩增HtrA2基因编码框,用KpnI和BamHI将TS-HtrA2及目的载体pEC3.1(+)两步法双酶切,然后进行连接转化,构建基因重组载体radE5-HtrA2,包装重组腺病毒,RT-PCR检测重组腺病毒基因mRNA的表达并提取蛋白进行Westernblot检测。结果:重组真核表达载体radE5-HtrA2经限制性内切酶分析,双酶切之后的条带与理论
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