【摘 要】
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目的 研究靶向c-Myc和血管内皮生长因子(VEGF)基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒对人结直肠癌细胞株的影响.方法 设计靶向c-Myc和VEGF的特异性siRNA.应用体内载体表达法合成其表达质粒,转染人结直肠癌细胞株Volo后,以Western blot检测c-Myc和VEGF的蛋白表达;以MTT、流式细胞术、TUNEL染色分析、基质胶侵袭实验检测细胞增殖活性、凋亡特性、细胞周期分
【机 构】
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目的 研究靶向c-Myc和血管内皮生长因子(VEGF)基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒对人结直肠癌细胞株的影响.方法 设计靶向c-Myc和VEGF的特异性siRNA.应用体内载体表达法合成其表达质粒,转染人结直肠癌细胞株Volo后,以Western blot检测c-Myc和VEGF的蛋白表达;以MTT、流式细胞术、TUNEL染色分析、基质胶侵袭实验检测细胞增殖活性、凋亡特性、细胞周期分布及侵袭能力的改变.结果 酶切及DNA测序证实c-Myc和VEGF的siRNA表达质粒均构建成功.转染细胞后,与对照组相比较,重组质粒组细胞c-Myc和VEGF的蛋白表达水平显著下调明显(均P<0.01).重组质粒c-Myc组、VEGF组和c-Myc加VEGF组细胞增殖抑制率分别为(59.20±5.05)%、(32.31±3.48)%和(75.81±7.89)%;细胞凋亡率分别为(40.50±4.37)%、(21.30±2.98)%和(62.59±9.66)%,均显著高于对照组 [细胞增殖抑制率(6.80±1.45)%;细胞凋亡率(2.90±0.36)%;均P<0.05].重组质粒VEGF组和c-Myc加VEGF组的细胞侵袭率分别为(7.34±3.65)%和(2.80±1.02)%,明显低于对照组的(18.57±7.46)%(P<0.05).其中,重组质粒c-Myc加VEGF组细胞增殖、调亡及侵袭性的改变最为显著,明显高于另外两个重组质粒组(均P<0.05).结论 特异性siRNA有效抑制了人结直肠癌Volo细胞c-Myc和VEGF的表达,从而抑制了肿瘤细胞的增殖活性和侵袭性,并诱导细胞凋亡,两者具有协同作用。
其他文献
随着标准胃癌根治性手术的推广和普及,以及高频电刀在手术中的广泛使用,由电损伤直接切割所致的创伤性局限性胰腺炎的发生有增加趋势[1]。
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目的 探讨免疫调节药物FTY720对小肠移植后急性移植物抗宿主病(GVHD)的治疗效果及其作用机制.方法 应用Wistar-Furth(WF)大鼠作为供体,WF和ACI大鼠的子代(F1)作为受体,同种异基因异位全小肠移植的技术方法建立GVHD的动物模型.移植受体分为实验组和对照组,每组6只.实验组从移植手术当日开始予以FTY720治疗,持续14 d;对照组在相同的时间段口服蒸馏水.术后第15天,提
胃肠间质瘤是胃肠道中最常见的非上皮来源的肿瘤,可以与胃的其他组织来源的肿瘤同时发生,如癌、类癌及淋巴瘤[1-3].1996-2007年间,复旦大学附属肿瘤医院收治了8例胃癌伴胃间质瘤的患者,现将其诊治及预后情况总结如下。
目前,腹腔镜治疗胃间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GIST)手术方式主要有3种,即腹腔镜胃腔外手术、腹腔镜胃镜联合胃腔内手术和腹腔镜经胃前壁造口手术~([1-6]).我院2006年10月至2008年7月,共施行胃造口缝合法腹腔镜下胃后壁间质瘤切除术12例,效果满意.现报道如下.
患者男,57岁.因上腹部隐痛伴黑便半年于2009年1月5日入院,经胃镜及活检提示为胃窦部溃疡型中分化腺癌,遂行胃癌D2根治术,毕Ⅱ式胃肠吻合术。
目的 探讨不同剂量奥曲肽对术后粘连性肠梗阻的疗效.方法 将90例术后粘连性肠梗阻(非绞窄性)患者分为奥曲肽常规剂量组(基础治疗加奥曲肽0.1 mg皮下注射,1/8 h)、加倍剂量组(基础治疗加奥曲肽0.1 mg皮下注射,1/4 h)和对照组(基础治疗),比较3组患者治疗7 d后的临床症状、胃肠减压量及实验室指标的变化。
目的 探讨N0期结直肠癌组织中的上皮型钙黏附索(E-cad)表达与淋巴结微转移的关系.方法 应用荧光定量PCR法检测62例病理证实的N0期结直肠癌患者548枚淋巴结中CK20 mRNA的表达;同时用免疫组织化学方法检测结直癌组织中E-cad的表达:对上述两种指标的表达进行相关分析.结果 本组62例结直肠癌患者CK20 mRNA阳性率(淋巴结微转移率)为38.7%(24/62);E-cad高表达率为
近年来,结直肠肿瘤手术治疗方面的一个主要进展是微创技术的普及.结直肠肿瘤的微创手术包括结肠镜下肿瘤切除术、腹腔镜手术及以其为基础发展起来的机器人手术和经肛门内镜显微手术三大类。