【摘 要】
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用大肠杆菌高效表达日本血吸虫中国大陆株26 kD GST基因(Sj26)并观察表达产物诱导的免疫保护效果.将Sj26基因亚克隆至pET28b(+)中构建重组表达质粒Sj26/pET,转化大肠杆菌BL21
【机 构】
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中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放试验室上海 200232中国科学院上海生物化学研究所上海 200031;
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用大肠杆菌高效表达日本血吸虫中国大陆株26 kD GST基因(Sj26)并观察表达产物诱导的免疫保护效果.将Sj26基因亚克隆至pET28b(+)中构建重组表达质粒Sj26/pET,转化大肠杆菌BL21(DE3).Sj26在诱导条件下及未诱导条件下均获得高效表达.表达产物(rSi26GST)以包含体形式表达,分子量为28 kD左右,能用6×His亲和层析柱纯化,纯化产量为55～60mg/L大肠杆菌培养物.免疫印迹及ELSA实验证实rSj26GST具有良好抗原性.用rSj26GST不加佐剂直接背部皮下免疫昆明系小鼠,获得了19.6%(P＜0.05)的减虫率及31.9%(P＜0.05)的成熟虫体减虫率;且免疫组检获的虫体中未成熟虫体的比例为32%(66/206),明显高于对照组的19.6%(56/285)(P＜0.00),说明rSj26GST免疫不仅可诱导抗日本血吸虫的部分攻击感染作用,而且能抑制部分虫体的发育.
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