【摘 要】
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以猪胰脂肪酶为例,针对传统橄榄油乳化法存在准确度较低、重现性不佳等问题,对底物浓度及用量、均质时间、缓冲液添加量、反应体系温度、反应环境等反应条件进行了优化研究:
【基金项目】
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2010年浙江海洋学院大学生科技创新项目
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以猪胰脂肪酶为例,针对传统橄榄油乳化法存在准确度较低、重现性不佳等问题,对底物浓度及用量、均质时间、缓冲液添加量、反应体系温度、反应环境等反应条件进行了优化研究:以20%橄榄油乳化液5mL代替25%橄榄油乳化液4mL,以3mL磷酸盐缓冲液代替5mL磷酸盐缓冲液,将均质处理的速度与时间由高速(>10000r/min)、6min降低为5000r/min、2min,将反应体系温度由40℃降低为35℃,改变静止的反应环境为在100r/min下振荡反应,选择在空白组反应体系中加入1mL0.025mol/LpH7.5磷酸缓冲液代替1mL酶液。优化后的条件下测得的脂肪酶活力较优化前提高了35%以上,平行测定的RSD值为5.5%,方法的精密度较高。
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