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目的:建立土霉素及其软膏的含量测定方法.方法:高效液相色谱法.采用Luna-C18色谱柱,以0.05 mol/L草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2 mol/L磷酸氢二铵溶液(75∶20∶5)为流动相(用氨试液调pH值至8.0±0.2),用紫外检测器在280 nm波长处检测.结果:土霉素浓度在0.01~0.50 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.4%.结论:高效液相色谱法准确、快速、稳定,可用于土霉素及其软膏的含量测定.