人IL-24基因原核表达载体的构建及蛋白的表达纯化

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：studentxp2007

【摘要】

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构建人白细胞介素24（IL-24）原核表达载体并利用ELP-Intein系统表达纯化可溶性的IL-24蛋白。通过PCR扩增不含信号肽的人IL-24基因,将IL-24基因插入p ET-ELP-Intein质粒构建重组

【作者】

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喻放杨忠华范汉东左振宇

【机构】

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武汉科技大学,杭州师范大学衰老研究所

【出处】

：

生物技术通报

【发表日期】

：

2016年2期

【关键词】

：

白细胞介素24 质粒构建原核表达蛋白纯化 IL-24 recombinant plasmid construction prokaryotic expr

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构建人白细胞介素24（IL-24）原核表达载体并利用ELP-Intein系统表达纯化可溶性的IL-24蛋白。通过PCR扩增不含信号肽的人IL-24基因,将IL-24基因插入p ET-ELP-Intein质粒构建重组表达载体p ET-ELP-Intein-IL-24。将重组质粒转化至E.coliBLR（DE3）,20℃下经IPTG诱导表达。利用ELP蛋白在不同温度下发生相变的特点和Intein蛋白的自切割反应纯化可溶性IL-24蛋白,将纯化得到的IL-24蛋白进行Western blot鉴定。用Annexi

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