【摘 要】
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目的建立一种基于生物发光技术的定量检测PCR产物的方法,并用于HBV定量PCR检测.方法首先利用ATP硫酰化酶(ATP sulfurylase)将焦磷酸(PPi)定量转化成ATP,然后利用虫荧光素酶(l
【机 构】
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430064,华中科技大学同济医学院
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目的建立一种基于生物发光技术的定量检测PCR产物的方法,并用于HBV定量PCR检测.方法首先利用ATP硫酰化酶(ATP sulfurylase)将焦磷酸(PPi)定量转化成ATP,然后利用虫荧光素酶(luciferase)系统发光检测ATP,从而确定样品中PPi含量.利用2次PCR法扩增HBV DNA目的片段,并进行回收纯化定量,以之作为阳性标准模板制作标准曲线.选择适当的循环次数扩增样品中HBV DNA,利用化学发光法检测扩增产物中PPi的量,进而确定样品中HBV DNA模板的量.结果当起始模板量为(1
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