【摘 要】
：
目的构建含报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)的分泌型真核表达载体pSecTag-EGFP,用以研究pSecTag/HygroB转染鸡胚胎成纤维细胞的转染效率,为目的基因的成功表达奠定基础。方法
【机 构】
：
泰山医学院生命科学研究所,中国农业科学院畜牧研究所
论文部分内容阅读
目的构建含报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)的分泌型真核表达载体pSecTag-EGFP,用以研究pSecTag/HygroB转染鸡胚胎成纤维细胞的转染效率,为目的基因的成功表达奠定基础。方法用PCR方法克隆得到EGFP基因,通过酶切、连接、转化构建pSecTag-EGFP分泌型真核表达载体,设计优化实验,通过脂质体介导的方法转染鸡胚胎成纤维细胞,在荧光显微镜下直接观察该基因的表达。用B radford法检测不同组合的细胞培养液中的EGFP蛋白的相对含量。结果脂质体介导的方法能有效转染鸡胚胎成纤维细胞,实验中EGFP蛋白相对表达量随质粒量的增加而明显升高(P<0.01)。其中脂质体2μl、质粒1.0μg时目的蛋白相对表达量最高。结论pSecTag-EGFP质粒构建成功,并成功优化了转染条件。
其他文献
<正>一位默默无闻的美国中学教师,用十年时间写下令自己一夜成名的故事,虚构了西雅图附近一座香杉积翠,草莓遍地的海岛,一处被海水封闭的小型人世,交织上演着爱情、战争、种
城市河流对城市起到蓄水用水、行船通航、防洪排涝等作用。到近代,城市河流环境更是市民乐水、亲水,休憩游览的好去处。在国家大力推进的新形势下,城市河流生态景观建设将是
目的研究脑卒中患者预后的影响因素。方法前瞻性研究我院神经内科连续入院的脑卒中患者130例,对其进行分析。结果经单因素和多因素Logistic回归分析,最终确定脑卒中预后的主
选取入我院行乳腺区段切除术的患者120例,均为ASAⅠ-Ⅱ级。随机分为对照组和观察组各60例,对照组行常规手术医院全程康复模式,观察组行医院-社区延伸康复模式,行生活质量评价
本文通过对研究区内的地质特征进行详细研究,总结了其地质特征、地球物理特征、地球化学特征,通过对矿体及围岩蚀变的总结,分析了其成矿规律及找矿标志,确定该矿床为沉积型铁
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”＄ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’＃陈川个美食
Back to yield
20世纪上半叶的"乡村教育"实验运动,具有丰富的现代化教育思想和主张."乡村教育"运动的先驱者们进行长期的探索、积极实践,为中国教育现代化做出了重大贡献,实质上这也是中国