【摘 要】
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γ－干扰素（简称ＩＦＮ－γ）首次被描述和提纯是基于它能干扰成纤维细胞中病毒的复制．干扰素阻止病毒复制的能力是很多种生物学检测ＩＦＮ－γ方法的依据．在外周血清里的天然ＩＦＮ－γ含量可能低于目前免疫
【机 构】
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中国人民解放军第二五三医院免疫检测中心; 中国人民解放军海军医学研究所;
【基金项目】
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解放军总后勤部卫生部立项，北京军区卫生部资助课题
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γ－干扰素（简称ＩＦＮ－γ）首次被描述和提纯是基于它能干扰成纤维细胞中病毒的复制．干扰素阻止病毒复制的能力是很多种生物学检测ＩＦＮ－γ方法的依据．在外周血清里的天然ＩＦＮ－γ含量可能低于目前免疫学检测方法的极限．因此，我们建立了一种改良的免疫ＰＣＲ检测方法〔１２〕，即将抗原抗体反应的专一性同ＰＣＲ技术的高敏感性相结合，构建一种集ＡＢＣ及ＰＣＲ于一体的双重放大系统．用兔抗ＩＦＮ－γ多抗包被酶联板、加ＩＦＮ－γ反应后再依次加生物素标记抗ＩＦＮ－γ单克隆抗体、链亲和素、生物素标记ｐＩＮＭ３０质粒，最后用不等量一对引物（引物１：２５ｐｍｏｌ；引物２：５ｐｍｏｌ）扩增约２００ｂｐ碱基对的ＤＮＡ片段．利用这种技术检测ＩＦＮ－γ，并与ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法比较其敏感性．结果表明应用免疫ＰＣＲ技术，１．２５ｐｇ／ｍｌＩＦＮ－γ时即可出现阳性结果．敏感性较ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法高出１０２倍
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