二连体人干细胞因子基因的构建及其在昆虫细胞中的表达

来源 :南京大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chxong

【摘要】

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应用DNA重组技术构建两端为人干细胞因子(hSCF)1～165肽编码区,中间为柔性连接肽(GGGGSGGGGSGG)编码区的头尾相连的二连体基因(dSCF),并将其插入杆状病毒转移载体pVL1392中.重

【作者】

：

唐晶朱洁智强焦瑞清韩俊海秦浚川

【机构】

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南京大学医药生物技术国家重点实验室

【出处】

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南京大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2002年2期

【关键词】

：

二连体人干细胞因子昆虫细胞共价二聚体昆虫表达体系 DAN重组技术基因表达基因重组 human stem cell factor covalently

【基金项目】

：

高等学校博士学科点专项科研项目

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应用DNA重组技术构建两端为人干细胞因子(hSCF)1～165肽编码区,中间为柔性连接肽(GGGGSGGGGSGG)编码区的头尾相连的二连体基因(dSCF),并将其插入杆状病毒转移载体pVL1392中.重组转移载体pVL1392-dSCF与野生型苜蓿夜蛾核型多角体病毒AcNPvDNA共转染草地贪夜蛾细胞Sf9,经胞内同源重组和4轮筛选获得纯净的重组病毒AcNPV-dSCF.重组病毒感染Sf9单层培养细胞时,主要以分泌形式表达二连体蛋白,经MTT比色法测得dSCF的表达量约为1 180 units/3

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