利用慢病毒载体建立fractalkine基因敲低的HK-2稳定细胞株

来源 :中国组织化学与细胞化学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:glory212
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目的利用慢病毒载体建立fractalkine(FKN)基因敲低的HK-2稳定细胞株,为探讨FKN基因在肾脏组织肾小管上皮细胞转分化(EMT)重构中的作用奠定实验基础。方法通过双酶切将FKN目的基因连接到GV248载体(hU6-MCS-Ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin),经扩增、转化、验证、测序、质粒抽提,将携带目的基因的工具GV248载体质粒及病毒包装辅助质粒Helper1.0、Helper2.0转染293T细胞,完成慢病毒包装及质量检测后获取慢病毒工具载体LV-FKN-RNAi
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