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目的：建立特异、灵敏的荧光PCR检测乙型肝炎病毒cccDNA的方法。方法：首先用煮沸法提取血清中的HBV DNA，然后用绿豆核酸酶（Mung Bean Nuclease）消化松弛环状HBV DNA（rcDNA），保留共价闭合环状DNA（cccDNA）。设计一条嵌合引物，该引物分为两部分序列，近5′部分为人为设定的序列，近3′部分是与正链缺口下游互补序列。先用该嵌合引物以正链为模板，自HBV cccDNA1590nt开始向上游延伸，然后以嵌合引物中人为设定的序列为下游引物、与负链互补的上游引物以及一条在两引