【摘 要】
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目的 探讨溴美喷酯对瘢痕成纤维细胞增殖与Ⅰ型胶原、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达以及Smad3磷酸化的影响.方法 分离提取人原代瘢痕成纤维细胞进行培养,实验分为空白对照组
【机 构】
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第二军医大学附属长海医院烧伤外科,上海,200433
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目的 探讨溴美喷酯对瘢痕成纤维细胞增殖与Ⅰ型胶原、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达以及Smad3磷酸化的影响.方法 分离提取人原代瘢痕成纤维细胞进行培养,实验分为空白对照组和不同浓度的溴美喷酯(0.5、1.0、2.0 mg/mL)干预组,应用CCK-8方法检测溴美喷酯对细胞增殖的影响,RT-PCR方法检测各组细胞中Ⅰ型胶原、α-SMA的mRNA表达变化,Western blot方法检测各组细胞中Ⅰ型胶原、α-SMA、Smad3和磷酸化Smad3(pSmad3)的蛋白表达变化.结果 细胞增殖实验显示不同浓度的溴美喷酯干预组较对照组细胞增殖降低,其中2.0 mg/mL降低最明显.RT-PCR结果显示不同浓度的溴美喷酯干预组中Ⅰ型胶原、α-SMA的mRNA表达较对照组减少(P＜0.05),在2.0 mg/mL时效果最显著.Western blot结果同样显示不同浓度干预组中Ⅰ型胶原、α-SMA的蛋白合成减少(P＜0.05),而且干预组中pSmad3蛋白较对照组减少,但Smad3蛋白表达比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 溴美喷酯能够抑制瘢痕成纤维细胞的增殖并减少Ⅰ型胶原、α-SMA的表达,而且还能够减少Smad3的活化,但对Smad3蛋白表达无明显影响,表明溴美喷酯或许能够通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路中Smad3的磷酸化来降低瘢痕成纤维细胞的纤维化活动.
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