【摘 要】
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人工转录装置可以按照所设计的方式在原核细胞和真核细胞中调节基因表达。这里,我们在大肠杆菌中设计并构建了一种由合成启动子和人工转录因子构成的人工转录装置:其中,合成
【机 构】
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华东理工大学生物反应工程国家重点实验室鲁华所; 上海交通大学系统生物学研究所;
【基金项目】
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中国国家自然科学基金(31370080)资助
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人工转录装置可以按照所设计的方式在原核细胞和真核细胞中调节基因表达。这里,我们在大肠杆菌中设计并构建了一种由合成启动子和人工转录因子构成的人工转录装置:其中,合成启动子包含了一种弱启动子Plac突变体与位于其上游的l噬菌体操纵区（OR2或OR3）的不同组合,而人工转录因子则利用细菌RNA聚合酶α亚基的N端和■噬菌体CI蛋白的C端组成的融合蛋白α-CI作为效应域,CI蛋白作为DNA结合结构域。利用绿荧光蛋白作为报告基因对这一人工转录装置检测发现,它可以成功开启报告基因的转录活性。随后通过改变这一人工转录装置的某些参数,例如,增加启动子上游操纵序列的拷贝数、使用温敏型CI取代野生型CI、在系统中引入CI的阻遏蛋白Cro等多种方式,实现了对报告基因转录强度的精细调控。这一人工可调控转录装置可以在原核细胞中实现对报告基因表达强度的精细调控,在原核细胞中调节基因线路的信号输出强度方面具有一定的应用前景。
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