产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆、表达及其抗血清的制备

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chao1028
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本试验通过设计并合成1对引物,PCR扩增B型产气荚膜梭菌C58-2株α毒素完整成熟肽序列,并将其插入到pGEM-T Easy载体中,构建克隆载体pGEM-T-α。对克隆载体pGEM-T-α进行EcoRⅠ和HindⅢ的双酶切,将得到的1 125bp片段以正确的阅读框架定向克隆于pET-28a(+)中,然后将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plys宿主菌中,37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导该片段获得良好表达。经SDS-PAGE分析,其表达的蛋白约为46.1ku,与预期大小一致。Western
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