绵羊肺腺瘤病毒实时荧光PCR检测方法的建立

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为建立绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)实时荧光定量PCR检测方法,本研究根据JSRV的gag基因,选取其保守序列作为检测目的片段,设计并合成相应的引物和TaqMan探针,以自然病例的肺肿瘤组织基因组DNA为模板,经PCR扩增目的基因构建重组质粒pMD—gag,并将其作为阳性标准品,梯度稀释建立标准曲线,得到扩增方程为:y=-0.304x+38.4,扩增效率为100%,线性相关系数为0.999,该方法最低检出量为10^3拷贝,与其它病原核酸样品无交叉反应,其变异系数在1.374%以内。本研究为快速检测JSRV以及
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