【摘 要】
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目的构建日本血吸虫(中国大陆株)信号蛋白14-3-3编码基因原核表达质粒pET28a-Sj14-3-3,测定Sj14-3-3基因序列,并为中国大陆株Sj14-3-3的体外表达奠定基础.方法采用RT-PCR技术
【机 构】
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安徽医科大学病原生物教研室,蚌埠医学院临床免疫学教研室
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目的构建日本血吸虫(中国大陆株)信号蛋白14-3-3编码基因原核表达质粒pET28a-Sj14-3-3,测定Sj14-3-3基因序列,并为中国大陆株Sj14-3-3的体外表达奠定基础.方法采用RT-PCR技术从日本血吸虫中国大陆株成虫总RNA中扩增出Sj14-3-3基因,扩增产物经纯化后,用BamH I+Xho I双酶切,定向克隆入pET28a质粒,转化大肠杆菌DH5α,再用BamH I+Xho I双酶切及PCR扩增对重组子进行鉴定.用Sanger双脱氧链终止法进行DNA序列测定,并应用在线软件进行同源性
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