【摘 要】
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目的考察人结直肠肿瘤细胞株DLD-1上甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合特性;与CCK-A和CCK-B比较,找出不同之处.方法 125 I标记甘氨酸延伸型胃泌素,反相高压液相纯化.用DLD-1细胞
【基金项目】
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Austin Hospital Medical Research Foundation(Australia);
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目的考察人结直肠肿瘤细胞株DLD-1上甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合特性;与CCK-A和CCK-B比较,找出不同之处.方法 125 I标记甘氨酸延伸型胃泌素,反相高压液相纯化.用DLD-1细胞进行受体结合试验,检测甘氨酸延伸型胃泌素受体结合试验受金属离子K+、Mg2+、Al3+及温育温度、时间的影响;拮抗剂竞争抑制试验比较各种拮抗剂的作用. 结果金属离子K+、Mg2+能提高甘氨酸延伸型胃泌素受体的特异结合,以100mmol/L Tris HCl缓冲液中含100mmol/L K+,2mmol/L Mg2+为最佳;缓冲液含二个蛋白酶抑制剂时的最大结合发生在37℃温育90min;没有蛋白酶抑制剂的最大结合发生在37℃温育60min.甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合不被特异性CCK-A受体拮抗剂或特异性CCK-B受体拮抗剂拮抗,能被非特异性胃泌素受体拮抗剂benzotript拮抗.结论甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合特性不同于CCK-A或CCK-B受体.DLD-1细胞上的甘氨酸延伸型胃泌素受体既能与甘氨酸延伸型胃泌素结合,也能与酰胺化胃泌素结合,是一个不同于CCK-A和CCK-B的受体.
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