斑马鱼PKR的dsRBM1和dsRBM3重组及体外功能分析

来源 :井冈山大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：augenthaler

【摘要】

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为了重组斑马鱼(Daniorerio)双链RNA依赖的蛋白激酶(DrPKR)的双链RNA结合模体1(dsRBM1)和双链RNA结合模体3(dsRBM3)基因,并对重组基因表达的蛋白进行鉴定和功能分析,设计定向

【作者】

：

柳铭山周细根欧湘滢高宗泽李婷婷冯敏何

【机构】

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井冈山大学医学部基础医学与药学院

【出处】

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井冈山大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2019年4期

【关键词】

：

DrPKR dsRBM13 二聚化 Poly I:C pull-down 重组

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(31560595);江西省教育厅科技计划项目(GJJ170630);井冈山大学第六批大学生创新创业训练计划项目(65)

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为了重组斑马鱼(Daniorerio)双链RNA依赖的蛋白激酶(DrPKR)的双链RNA结合模体1(dsRBM1)和双链RNA结合模体3(dsRBM3)基因,并对重组基因表达的蛋白进行鉴定和功能分析,设计定向删除引物,应用PCR技术扩增DrPKR的ds RBM1和dsRBM3的基因片段,通过重叠PCR技术将dsRBM1和dsRBM3基因重组在一起得到dsRBM13基因,再将dsRBM13构建到原核表达质粒pET32a上并表达和纯化蛋白;通过表达蛋白的二聚化实验和pull down实验对重组蛋白dsRBM1

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