【摘 要】
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目的 探讨星状胶质细胞内miR-31调控PKD1基因表达并抑制JAK-STAT3信号通路活化介导缺血性脑卒中小鼠的炎症反应以及神经元氧化应激损伤的保护机制.方法 将雄性C57BL/6J小鼠60
【机 构】
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110032沈阳,中国医科大学附属第四医院神经内科
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目的 探讨星状胶质细胞内miR-31调控PKD1基因表达并抑制JAK-STAT3信号通路活化介导缺血性脑卒中小鼠的炎症反应以及神经元氧化应激损伤的保护机制.方法 将雄性C57BL/6J小鼠60只构建大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,分组为:MCAO组、miR-31 mimic MCAO组、miR-31 inhibitor MCAO组、si-PKD1 MCAO组,并设Control组和Sham组.TTC染色计算脑梗死体积;Nissl染色检测神经元缺失;免疫荧光法检测GFAP和PKD1蛋白表达;TUNEL法检测细胞凋亡;MTT检测神经元存活率;乳酸脱氢酶(LDH)漏出率测定神经元细胞损伤;免疫荧光法检测4-HNE和8-HOdG表达;TBA法检测MDA含量;黄嘌呤氧化酶法检测SOD含量;ELISA检测炎症因子;qRT-PCR检测miR-31和PKD1的表达;Western blot检测PKD1及JAK-STAT3通路相关蛋白表达.结果 与MCAO组相比,miR-31 inhibitor MCAO组神经功能评分,梗死体积,神经元缺失,凋亡率,cleavedCaspase-3和Bax的表达,4-HNE和8-OHdG免疫染色强度,炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α,MDA含量,PKD1表达均显著升高,SOD表达量降低(均P＜0.05);miR-31 mimic MCAO组和si-PKD1 MCAO组神经功能评分,梗死体积,神经元缺失,凋亡率,cleaved Caspase-3和Bax的表达,4-HNE和8-OHdG免疫染色强度,炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α,MAD含量,PKD1表达均显著降低,SOD表达量上升(均P＜0.05);在MCAO小鼠的星状胶质细胞内,miR-31呈低表达,PKD1呈高表达,JAK-STAT3通路呈激活状态.结论 MCAO小鼠的星状胶质细胞内miR-31靶向下调PKD1基因抑制JAK/STAT3信号通路,降低炎症反应,从而减轻MCAO神经元氧化应激损伤.
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