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目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白的抗原性及患者血清F抗体的流行率.方法 利用11条引物延伸获得HCV f基因,以此为模板经聚合酶链反应扩增得到截短型f65基因片段,定向克隆至pET32a(+),重组子转化大肠杆菌Plyss菌株,异丙基-β-半乳糖苷诱导后用镍离子树脂纯化HCV F65蛋白.以F65蛋白为抗原,酶联免疫吸附法检测HCV感染者血清中F抗体.应用F65蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆F抗体,再用葡萄球菌A蛋白树脂纯化兔血清中F抗体.结果 成功构建了pET32a(+)f65重组子,表达并纯化了分子量为3.2×104的HCV F65蛋白.30份HCV患者血清F抗体的A450为0.125 ± 0.061,F抗体阳性率为63.3%.获得了兔源性F抗体,该抗体与HCV F65蛋白发生特异性结合反应,滴度为1:30 000.结论 HCV F65蛋白具有抗原性,可用来检测血清中F抗体.HCV患者血清中存在F抗体.兔源性F抗体可用来检测HCV F蛋白。