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【摘要】 目的 通过实验条件的优化选择，摸索出适用于海水贝类食品中贝类毒素的检测方法，摸清常见贝类毒素的污染状况。方法 本次调查采用国际公认的AOAC标准生物检测方法PSP和DSP的小白鼠生物试验法。结果 在采集的80份海水贝类样品中检出麻痹性贝类毒素13份，检出均值为55μg/100g；11份样品检出腹泻性贝类毒素，检出均值为12μg/100g。结论 小白鼠生物试验法测定贝类毒素取材方便、方法简单、快速，适于基层单位应用。
【关键词】 贝类毒素；含量；调查
文章编号：1004-7484（2013）-02-0923-01
近年来，我国周边海域海水贝类被赤潮污染的情况时有发生，贝类通过滤食有毒微藻，经过生物累积和放大转化为贝类毒素，它是毒性很强的非蛋白毒素，毒性大、反应快、无适宜解毒剂，具有突发性和广泛性，这些特点都给防治带来了许多困难。近1O年来，据不完全统计，在菲律宾已有40多人因麻痹性贝类毒素中毒夺去生命，在危地马拉两天内就有26人因中毒而丧生，有报道连云港市1991年至2003年报告的11起麻痹性贝类中毒中死亡人数为8人。营口市位于辽东半岛西北部，近海滩涂和浅海养殖水域有4万余亩，蕴藏杂色蛤、毛蚶、缢蛏、大竹蛏等贝类资源价值约2亿元，年产扇贝、杂色蛤、文蛤、蛏子等近万吨，但目前辽东湾、渤海湾赤潮处于多发期，仅去年渤海全年共发生赤潮7次，严重赤潮可使50%以上养殖贝类死亡。虽然我国近年来在近岸海域实施了贻贝监测计划，结果表明，我国近岸海域贝类体内的滴滴涕、镉、铅和砷的残留水平总体呈现下降趋势，但贝类毒素含量调查工作尚未开展。因此，开展营口沿海贝类毒素含量特征的调查研究工作，意义重大。
1 材料与方法
贝类毒素的种类繁多，不同种类的毒素引起人类中毒的症状不尽相同。贝类毒素主要分为4类：麻痹性贝毒（Paralytic shellfish poisoning，PSP）、腹泻性贝毒（Diarrheic shellfish poisoning，DSP）、记忆缺损性贝毒（Amnesic shellfish poisoning，ASP）、神经性贝毒（Neurotoxic shellfish poisoning，NSP）。其中对人类危害性较大的是腹泻性贝类毒素（DSP）和麻痹性贝类毒素（PSP）。国内外检测贝毒方法主要有三种：小白鼠生物试验法、免疫法、高效液相色谱化学仪器检测法，我国目前对贝毒检测的标准仅限于PSP和DSP的小白鼠生物试验法和ASP的HPLC方法，本次调查采用小白鼠生物试验法测定PSP和DSP，该方法是目前惟一得到国际公认的AOAC标准生物检测方法。
1.1 PSP的小白鼠生物试验法 取100g-150g样品，匀浆，再取100g样品加入100mL0.1mol/L的盐酸，搅拌并调pH值3.0左右，再加热煮沸5min，冷却至室温再次调节pH在2.0-4.0之间。将混合物转移到刻度量筒中，用酸水稀释到200mL，保持pH值在2.0-4.0之间，待上清液沉淀至呈半透明状态后将上清液倒出，此提取液即可进行小白鼠注射。
1.2 DSP的小白鼠生物试验法 取样品200g以上，用丙酮匀浆，过滤，减压浓缩丙酮提取液，再以乙醚溶解残渣，水洗醚层，浓缩存留的脂质提取物，用1%的吐温6O生理盐水悬浮，注射小白鼠。
2 结果
此次调查工作采集抽检了辖区内6家农贸市场和超市销售的海水贝类80份，其中扇贝、蛏子、黄蚬子、白蚬子、花蚬子、毛蚶子、牡蛎、文蛤各10份。检测结果显示，在6份扇贝、5份毛蚶子及2份文蛤中，检出麻痹性贝类毒素（PSP），检出均值为55μg/100g（限量标准为80μg/100g）；在5份扇贝、4份文蛤及2份毛蚶子中，检出腹泻性贝类毒素（DSP），检出均值为12μg/100g（限量标准为20μg/100g）。
3 讨论
目前，海洋毒素已经成为世界范围内食品卫生安全工作者的研究热点，我国所做的研究工作还远远不够，痕量贝类毒素的检测也尚不完善，而且各单位实验室之间的检测数据也存在可比性差的现象。我市沿海滩涂养殖资源极其丰富，为了控制有毒的贝类出口，避免贝类毒素超标而造成的国际贸易间的纠纷，促进营口经济的快速发展，保障人民群众的身体健康。通过本课题研究，采用简便、快速、灵敏的方法进行贝毒检测，及时对贝类毒素潛在的危害做出判断，建立贝类毒素安全卫生监测体系，不定期的进行监督管理，特别是在赤潮即将发生时，做好预报工作。同时，海洋毒素也是一种自然的产物，人类在预防它的毒性的同时，也将充分利用其生物活性作为生化和药物研究造福人类。
通过该项调查研究工作，一是通过实验条件的优化选择，摸索出适用于海水贝类食品中贝毒的检测方法，摸清贝毒的污染状况，及时掌握和评估我地区因食用贝类而导致食物中毒的风险，二是合理利用好本地区沿海丰富的滩涂养殖资源，控制有毒贝类出口，加快我地区海、淡水养殖业的健康发展。三是研究结果可做为研究我国沿海人群贝毒摄入量的变化趋势，为食品的安全性评估及标准的制定提供科学依据。
参考文献
[1] 于兵，曹际娟.ELISA与小白鼠法检测贝类麻痹性贝毒比较[J].检验检疫科学，2005，15（1）：32-35.
[2] 余亚英，袁唯.贝类毒素及检测方法的研究进展[J].食品研究与开发，2007，28（10）：175-178.
[3] 马敬军，曾名勇，周德庆.贝类毒素检验及排除方法的研究进展[J].中国海洋药物，2003，22（6）：41-45.
【关键词】 贝类毒素；含量；调查
文章编号：1004-7484（2013）-02-0923-01
近年来，我国周边海域海水贝类被赤潮污染的情况时有发生，贝类通过滤食有毒微藻，经过生物累积和放大转化为贝类毒素，它是毒性很强的非蛋白毒素，毒性大、反应快、无适宜解毒剂，具有突发性和广泛性，这些特点都给防治带来了许多困难。近1O年来，据不完全统计，在菲律宾已有40多人因麻痹性贝类毒素中毒夺去生命，在危地马拉两天内就有26人因中毒而丧生，有报道连云港市1991年至2003年报告的11起麻痹性贝类中毒中死亡人数为8人。营口市位于辽东半岛西北部，近海滩涂和浅海养殖水域有4万余亩，蕴藏杂色蛤、毛蚶、缢蛏、大竹蛏等贝类资源价值约2亿元，年产扇贝、杂色蛤、文蛤、蛏子等近万吨，但目前辽东湾、渤海湾赤潮处于多发期，仅去年渤海全年共发生赤潮7次，严重赤潮可使50%以上养殖贝类死亡。虽然我国近年来在近岸海域实施了贻贝监测计划，结果表明，我国近岸海域贝类体内的滴滴涕、镉、铅和砷的残留水平总体呈现下降趋势，但贝类毒素含量调查工作尚未开展。因此，开展营口沿海贝类毒素含量特征的调查研究工作，意义重大。
1 材料与方法
贝类毒素的种类繁多，不同种类的毒素引起人类中毒的症状不尽相同。贝类毒素主要分为4类：麻痹性贝毒（Paralytic shellfish poisoning，PSP）、腹泻性贝毒（Diarrheic shellfish poisoning，DSP）、记忆缺损性贝毒（Amnesic shellfish poisoning，ASP）、神经性贝毒（Neurotoxic shellfish poisoning，NSP）。其中对人类危害性较大的是腹泻性贝类毒素（DSP）和麻痹性贝类毒素（PSP）。国内外检测贝毒方法主要有三种：小白鼠生物试验法、免疫法、高效液相色谱化学仪器检测法，我国目前对贝毒检测的标准仅限于PSP和DSP的小白鼠生物试验法和ASP的HPLC方法，本次调查采用小白鼠生物试验法测定PSP和DSP，该方法是目前惟一得到国际公认的AOAC标准生物检测方法。
1.1 PSP的小白鼠生物试验法 取100g-150g样品，匀浆，再取100g样品加入100mL0.1mol/L的盐酸，搅拌并调pH值3.0左右，再加热煮沸5min，冷却至室温再次调节pH在2.0-4.0之间。将混合物转移到刻度量筒中，用酸水稀释到200mL，保持pH值在2.0-4.0之间，待上清液沉淀至呈半透明状态后将上清液倒出，此提取液即可进行小白鼠注射。
1.2 DSP的小白鼠生物试验法 取样品200g以上，用丙酮匀浆，过滤，减压浓缩丙酮提取液，再以乙醚溶解残渣，水洗醚层，浓缩存留的脂质提取物，用1%的吐温6O生理盐水悬浮，注射小白鼠。
2 结果
此次调查工作采集抽检了辖区内6家农贸市场和超市销售的海水贝类80份，其中扇贝、蛏子、黄蚬子、白蚬子、花蚬子、毛蚶子、牡蛎、文蛤各10份。检测结果显示，在6份扇贝、5份毛蚶子及2份文蛤中，检出麻痹性贝类毒素（PSP），检出均值为55μg/100g（限量标准为80μg/100g）；在5份扇贝、4份文蛤及2份毛蚶子中，检出腹泻性贝类毒素（DSP），检出均值为12μg/100g（限量标准为20μg/100g）。
3 讨论
目前，海洋毒素已经成为世界范围内食品卫生安全工作者的研究热点，我国所做的研究工作还远远不够，痕量贝类毒素的检测也尚不完善，而且各单位实验室之间的检测数据也存在可比性差的现象。我市沿海滩涂养殖资源极其丰富，为了控制有毒的贝类出口，避免贝类毒素超标而造成的国际贸易间的纠纷，促进营口经济的快速发展，保障人民群众的身体健康。通过本课题研究，采用简便、快速、灵敏的方法进行贝毒检测，及时对贝类毒素潛在的危害做出判断，建立贝类毒素安全卫生监测体系，不定期的进行监督管理，特别是在赤潮即将发生时，做好预报工作。同时，海洋毒素也是一种自然的产物，人类在预防它的毒性的同时，也将充分利用其生物活性作为生化和药物研究造福人类。
通过该项调查研究工作，一是通过实验条件的优化选择，摸索出适用于海水贝类食品中贝毒的检测方法，摸清贝毒的污染状况，及时掌握和评估我地区因食用贝类而导致食物中毒的风险，二是合理利用好本地区沿海丰富的滩涂养殖资源，控制有毒贝类出口，加快我地区海、淡水养殖业的健康发展。三是研究结果可做为研究我国沿海人群贝毒摄入量的变化趋势，为食品的安全性评估及标准的制定提供科学依据。
参考文献
[1] 于兵，曹际娟.ELISA与小白鼠法检测贝类麻痹性贝毒比较[J].检验检疫科学，2005，15（1）：32-35.
[2] 余亚英，袁唯.贝类毒素及检测方法的研究进展[J].食品研究与开发，2007，28（10）：175-178.
[3] 马敬军，曾名勇，周德庆.贝类毒素检验及排除方法的研究进展[J].中国海洋药物，2003，22（6）：41-45.