太平洋牡蛎过敏原精氨酸激酶的分子克隆、表达纯化和免疫原性鉴定

来源 :中国食品添加剂 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kerrytony

【摘要】

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克隆太平洋牡蛎精氨酸激酶(CG-AK)基因,导入大肠杆菌(BL21(DE3))中,然后筛选重组菌株。通过SDS-PAGE对重组菌株中太平洋牡蛎精氨酸激酶(CG-AK)的诱导表达条件进行探究,经Ni2+

【作者】

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赵晓涵刘文颖程青丽谷瑞增鲁军李国明

【机构】

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中国食品发酵工业研究院

【出处】

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中国食品添加剂

【发表日期】

：

2021年2期

【关键词】

：

太平洋牡蛎精氨酸激酶分子克隆表达条件免疫原性过敏原 Pacific oysteras arginine kinase(AK) cDNA cloning

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(31671963),中国食品发酵工业研究院强院工程培育专项(院强院20-功能肽-505)

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克隆太平洋牡蛎精氨酸激酶(CG-AK)基因,导入大肠杆菌(BL21(DE3))中,然后筛选重组菌株。通过SDS-PAGE对重组菌株中太平洋牡蛎精氨酸激酶(CG-AK)的诱导表达条件进行探究,经Ni2+亲和层析柱纯化,通过SDS-PAGE、质谱(MALDI-TOF-MS)、圆二色(CD)光谱等方法从相对分子量、一级结构以及二级结构综合鉴定了重组CG-AK的准确性,同时使用SDS-PAGE和Western blot检测重组CG-AK的表达,并利用酶联免疫吸附(ELISA)对其免疫原性进行鉴定。成功克隆表达并鉴

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