蓝舌病病毒、流行性出血病病毒和帕利亚姆血清群病毒三重RT-qPCR检测方法的建立及应用

来源 :华南农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ding_zh
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
[目的]建立蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)、流行性出血病病毒(Epizootic hemorrhagic disease virus,EHDV)及帕利亚姆血清群病毒(Palyam serogroup virus,PALV)快速筛查和诊断的三重RT-qPCR检测技术.[方法]选择BTV的NS3、EHDV的NS1以及PALV的VP7基因作为靶基因,设计3组特异性引物和探针,建立3种病毒的三重RT-qPCR检测方法.对检测方法的灵敏度、特异性和重复性进行验证,同时使用我国分离的BTV、EHDV与PALV不同血清型毒株和对应的阳性血液样本,与24个BTV血清型及6个EHDV血清型参考毒株对该三重法的检测效果进行验证.[结果]三重RT-qPCR的扩增效率均可达90%以上,对3种病毒核酸拷贝数的检测下限均为10μL?1级别,与单重法的检测灵敏度相当;与阿卡斑病毒、小反刍兽疫病毒、口蹄疫病毒和牛流行热病毒之间无交叉反应;Ct值批内、批间变异系数均在2%以内;可检测出24种BTV血清型、6种EHDV血清型与3种PALV血清型,具有群特异性;可有效检测血液中的病毒核酸,检测结果与单重法一致.[结论]本研究建立的BTV、EHDV与PALV三重RT-qPCR具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于临床样本中对3种病毒的同时诊断与筛查.
其他文献
为深入解析核桃GRAS基因家族在低温胁迫中的生物学功能,本研究根据生物信息学模型搜索核桃基因组中GRAS基因,采用ExPASy、MEME、GSDS、MEGA6.0、String和Plantcare等软件分析
棉花种子萌发时的覆土深度是衡量其拱土力的重要因素,为准确测量种子深度,本课题组设计了1种基于磁场的棉花种深探测系统。将磁球和种子埋在同一处,利用磁球模拟种子位置,试
为探究蒙古黄芪(Astragalus mongholicus Bunge)种子在控制劣变(Controlled deterioration treatment,CDT)处理后种子活力及生理生化特性,以含水量为3.7%、6.6%、9.8%的蒙古
1 发病原因rn产后真胃移位在牧场时有发生,是指真胃位置发生变化,或者位于瘤胃左侧或者下方,或者向右形成皱褶即真胃扭转,从而导致奶牛机体营养代谢发生紊乱,在临床上,该病可
期刊
[目的]阐明甜玉米Zea mays L.saccharata Sturt.采后在不同贮藏温度、贮藏时间下可溶性固形物含量和挥发性风味物质的变化规律,为甜玉米采后品质性状研究奠定基础.[方法]以'
(本刊讯)八神奉命调金鼎,一气回春满降囊.12月11日,以“创新驱动、携手共赢”为主题的郑州中联2021商务年会成功在历史名城——荥阳市举行,郑州中联董事长陈玉鑫等公司领导以
期刊
为探索机械搅拌强度对牛粪与玉米秸秆混合厌氧发酵产气性能和系统稳定性的影响,确立牛粪与玉米秸秆混合厌氧发酵适宜的搅拌强度,将牛粪和玉米秸秆按照挥发性固体(VS)质量比7
为明确太行花属(Taihangia)植物的引种扩繁范围,探明环境因子对于太行花属植物生长的合适阈值,基于MaxEnt模型与ArcGIS地理信息系统模拟太行花属植物当前以及未来气候条件下适生区分布范围。结果显示,太行花属植物的适生区为E112.8°~115.3°、N33.2°~37.8°,其中高适生区面积800 km~2,主要分布在河北、河南和山西3个省份的交界处;降水量是主导太行花属植物分布的因素
为了探究辛硫磷对家蚕不同组织碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性的影响,经口喂食辛硫磷(对照组喂食无菌水),采用分光光度法检测家蚕脂肪体、血淋巴、中肠和丝腺ALP
为研究抗菌肽Fa-AMP的高效制备方法。采用大肠杆菌偏嗜性密码子设计编码该抗菌肽的核苷酸序列,通过重叠区扩增基因拼接法合成目的基因,并将其连接到表达载体pET-47b上,转化获