轮状病毒VP4、VP7基因的克隆与核苷酸序列分析

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用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从轮状病毒感染的细胞中扩增816bp、916bp的VP4、VP7片段中抗原表位区.通过T4DNA连接酶将其直接连接于克隆载体质粒pGEM-T上,转化至受体菌DH5α中.提取质粒经PCR扩增、酶切鉴定,证明重组质粒pT-V4、PT-V7中含有轮状病毒的VP4、VP7基因片段.经核苷酸序列分析,表明克隆了轮状病毒主要保护性抗原VP4、VP7基因中抗原表位区.
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