探讨FOXO3a-Bim信号通路在雷公藤内酯醇诱导膀胱癌T24细胞细胞凋亡的作用。
方法培养膀胱癌T24细胞，将实验分为空白对照组，雷公藤内酯醇组(50 nmol/L)，MK2206组(50 nmol/L雷公藤内酯醇＋5 μmol/L MK2206)，FOXO3a-siRNA组(50 nmol/L雷公藤内酯醇＋100 nmol/L FOXO3a-siRNA)和Bim-siRNA组(50 nmol/L雷公藤内酯醇＋100 nmol/L Bim-siRNA)，用噻唑蓝(MTT)法检测T24细胞生长抑制率，Annexin V/Propidium iodide (PI)双染法检测细胞凋亡，Western印迹方法检测p-Akt、Akt、p-FOXO3a、FOXO3a、Bim、Bax、cleaved-caspase 3表达。
结果25、50、100、250 nmol/L雷公藤内酯醇处理24 h(17%±9%、24%±5%、43%±8%、61%±8%)、48 h(20%±7%、34%±6%、56%±7%、74%±5%)和72 h(32%±8%、41%±7%、69%±7%、84%±3%)后细胞生长抑制率均明显高于对照组(P<0.05)。24、48、72 h的IC50分别为(113±10)、(91±8)、(68±5) nmol/L。24 h(10%±4%、15%±5%、29%±8%、46%±8%)、48 h(16%±5%、24%±6%、40%±7%、55%±9%)和72 h(27%±4%、38%±5%、50%±9%、65%±8%)后细胞凋亡率均明显高于对照组(均P<0.05)。25、50、100 nmol/L雷公藤内酯醇诱导细胞凋亡、降低p-Akt、p-FOXO3a表达同时增高Bim、Bax、cleaved-caspase 3表达。FOXO3a-siRNA及Bim-siRNA降低了雷公藤内酯醇诱导Bim、Bax、cleaved-caspase 3高表达。雷公藤内酯醇组细胞抑制率(30%±8%)明显高于空白对照组(P<0.05)。MK2206组(54%±6%)、FOXO3a-siRNA组(18%±7%)和Bim-siRNA组(11%±6%)细胞抑制率亦高于对照组，但与雷公藤内酯醇组相比，MK2206组细胞抑制率明显增高，FOXO3a-siRNA组和Bim-siRNA组细胞抑制率明显降低(P<0.05)。
结论雷公藤内酯醇通过激活FOXO3a-Bim信号通路诱导细胞凋亡，抑制T24细胞生长。