【摘 要】
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目的 研究维生素D和维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)在破骨细胞分化各阶段的作用及其机制.方法 从C57BL/6小鼠四肢骨骨髓中提取原代单核巨噬细胞(bone marrow derived m
【机 构】
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400038重庆,陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院骨科
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目的 研究维生素D和维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)在破骨细胞分化各阶段的作用及其机制.方法 从C57BL/6小鼠四肢骨骨髓中提取原代单核巨噬细胞(bone marrow derived macrophages,BMMs),使用核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear kappa B ligand,RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stlimulating factor,M-CSF)将BMMs诱导成破骨细胞.同时使用不同浓度(0.1、10、1 000 nmol/L)的1,25(OH)2D3进行干预,激活VDR.采用TRAP和FAK染色、噬骨实验、qPCR和Western blot等实验分析1,25(OH)2D3对破骨细胞生成的影响.结果 1,25(OH)2D3作为VDR的强激动剂,在1 000 nmol/L时能高效激活VDR,在mRNA和蛋白水平均抑制破骨细胞分化早期c-Fos和NFATc1的表达,以及抑制成熟期CtsK和MMP-9的表达(P＜0.05).1 000 nmol/L 1,25(OH)2D3显著下调IκB α的磷酸化水平(P＜0.05),从而抑制p65的核转位与磷酸化.结论 1 000 nmol/L 1,25(OH)2D3显著上调VDR的表达,1,25(OH)2D3激活VDR可通过IKB α/NF-κB p65信号通路抑制破骨细胞分化、融合和骨吸收活性.
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