【摘 要】
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目的 miR-486为首次从胎肝鉴定的miRNA,既往研究发现miR-486在红系白血病细胞等细胞中为一种低氧相关miRNA,本研究旨在于探索低氧条件下小鼠胚肺成纤维细胞3T3细胞miR-486的
【机 构】
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青海省人民医院呼吸与危重症医学科,青海西宁810007青海省人民医院血液风湿科;
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目的 miR-486为首次从胎肝鉴定的miRNA,既往研究发现miR-486在红系白血病细胞等细胞中为一种低氧相关miRNA,本研究旨在于探索低氧条件下小鼠胚肺成纤维细胞3T3细胞miR-486的表达变化,并明确miR-486在低氧诱导肺间质纤维化发病中的调控作用.方法 miR-486的过表达或沉默后用慢病毒技术,转染效率用流式细胞仪及qRT-PCR检测,转染效率均在85％以上.低氧条件及过表达或沉默miR-486 3T3细胞miR-486、FN、α-SMA、Collagen Ⅰ及CollagenⅢ的表达用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法进行检测.结果 与常氧培养3T3细胞相比,低氧6、12、24、48 h 3T3细胞miR-486表达降低(P＜0.05),而FN、α-SMA的表达升高(P＜0.05).过表达miR-486可以促进3T3细胞miR-486的表达,并可以下调FN、α-SMA、Col-lagen Ⅰ及CollagenⅢ的表达,表达量分别为1.000±0.094 vs.0.125±0.153,P=0.005;1.000±0.193 vs.0.044±0.001,P=0.010;1.000±0.057 vs.0.561±0.009,P=0.048;1.000±0.105 vs.0.275±0.045,P=0.013;而沉默miR-486则抑制3T3细胞miR-486的表达,促进FN、α-SMA、Collagen Ⅰ及CollagenⅢ的表达,表达量分别为1.000±0.012 vs.48.909±0.584,P=0.005;1.000±0.015 vs.4.416±0.311,P=0.039;1.000±0.270vs.8.892±0.484,P=0.003;1.000±0.005 vs.7.671±1.014,P=0.008.结论 MiR-486参与了调控低氧相关肺间质纤维化疾病进展过程.
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