【摘 要】
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目的建立定量检测HBsAg的化学发光磁微粒免疫分析法。方法 2株抗HBs单克隆抗体分别标记吖啶衍生物和生物素化,生物素化的抗HBs通过链霉亲合素包被到磁珠上形成致敏磁珠。将待
【机 构】
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东南大学生物科学与医学工程学院,江苏省医疗器械检验所,南京基蛋生物科技有限公司
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目的建立定量检测HBsAg的化学发光磁微粒免疫分析法。方法 2株抗HBs单克隆抗体分别标记吖啶衍生物和生物素化,生物素化的抗HBs通过链霉亲合素包被到磁珠上形成致敏磁珠。将待测标本加入吖啶标记的抗HBs(吖啶-抗HBs)与致敏磁珠的体系中,形成致敏磁珠-HBsAg-吖啶标记抗HBs夹心复合物,磁性分离清洗。重复加样1次,磁性捕获分离后激发吖啶衍生物发光,用化学发光分析仪检测光强度,计算标本中HBsAg的浓度。结果该法线性方程为Y=0.919X+4.28,相关系数r2为0.99,线性范围为0.019 7~250.00 IU/mL。灵敏度可达0.020 7 IU/mL。0.1、3.2和40 IU/mL样本各重复测定10次的变异系数(CV)值分别为2.70%、4.40%和2.70%。与Abbott公司HBsAg定量检测试剂盒(化学发光微粒子免疫检测法)检测40份标本浓度的线性相关方程为Y=0.980 8X+0.209 9,r2=0.99,两法结果差异无统计学意义(t=1.519,P>0.05)。以10、50、100和200 IU/mL作为检定点,各检定点相对偏差分别为0.18%、1.50%、1.71%和1.81%。结论建立的方法有较高的灵敏度、合适的线性,同时具备良好的可重复性,与Abbott公司试剂盒检测结果高度相关。
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