番鸭IFN—α基因在毕赤酵母中的分泌表达

来源 :中国兽医科技 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaogege0451

【摘要】

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利用PCR从质粒pGEM-T Easy/MD IFN扩增出番鸭IFN-α基因cDNA,将其插入到含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichia pastoris表达载体pPICZαC 3.6 kb中,测序,待其结果正确后,

【作者】

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王春霞王林川鄢志强陈庆华王政

【机构】

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华南农业大学

【出处】

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中国兽医科技

【发表日期】

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2003年7期

【关键词】

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番鸭 IFN-α基因毕赤酵母基因表达干扰素基因工程

【基金项目】

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广东省科技攻关项目

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利用PCR从质粒pGEM-T Easy/MD IFN扩增出番鸭IFN-α基因cDNA,将其插入到含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichia pastoris表达载体pPICZαC 3.6 kb中,测序,待其结果正确后,将重组质粒转化至酵母X-33,PCR法筛选出Mut+表型的转化子置于BMMY培养基中培养.用5 mL/L甲醇诱导表达4 d后,经SDS-PAGE分析可见1条约25 ku的清晰蛋白条带.试验结果表明pPICZαC 3.6 kb/MD IFN质粒构建成功,并且实现重组酵母高效分泌表达.

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