【摘 要】
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采用PolyATtract1000系统提取完整的斑节对虾肝胰腺mRNA,ZAPExpresscDNA合成试剂盒合成具有EcoRⅠ和XhoⅠ末端的双链cDNA.cDNA与经EcoRⅠ和XhoⅠ预消化的λZAPExpress载体连
【机 构】
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厦门大学生命科学学院,国家海洋局第三海洋研究所海洋生物工程重点实验室
【基金项目】
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国家海洋"863"计划资助项目(2001AA621130),国家海洋局海洋科技研究资助项目.
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采用PolyATtract1000系统提取完整的斑节对虾肝胰腺mRNA,ZAPExpresscDNA合成试剂盒合成具有EcoRⅠ和XhoⅠ末端的双链cDNA.cDNA与经EcoRⅠ和XhoⅠ预消化的λZAPExpress载体连接,再经GigapackⅢGold蛋白体外包装和感染E.coli菌株XL1-BlueMRF′,成功构建了库容量为7 7×105,重组率高达99 1%的cDNA表达文库.将初级文库进行扩增,并在滴定扩增文库时随机挑取9个噬菌斑,在辅助噬菌体ExAssist的作用下通过体内切除
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