金心黄杨(Euonymus japonica L. cv. aureo-pictus)叶片总蛋白质提取及双向电泳技术

来源 :北京农学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhoufei123456
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通过比较2种不同的植物叶片总蛋白质提取方法(三氯乙酸/丙酮法和酚法)和优化双向电泳各试验环节,建立金心黄杨叶片总蛋白质的提取方法,以及可以对其蛋白质组进行质谱分析的双向电泳条件。结果采用优化后的酚法进行金心黄杨叶片总蛋白质的提取,IEF蛋白上样量150μg,SDS-PAGE采用12.5%T凝胶,电泳结束后用考马斯亮蓝G-250染色,Melanie 7.0软件分析后得到约274个可分辨蛋白点。 By comparing the total protein extraction methods of two plant leaves (trichloroacetic acid / acetone method and phenol method) and optimize the two-dimensional electrophoresis of the various aspects of the experiment, the establishment of the extraction method of total protein in the heart of Golden Pine, and its proteome mass spectrometry Analysis of two-dimensional electrophoresis conditions. Results The optimized total phenolics were used to extract the total protein from the leaves of Golden Pine. The amount of IEF protein loaded was 150μg, SDS-PAGE was performed on 12.5% ​​T-gel. After electrophoresis, Coomassie brilliant blue G-250 staining and Melanie 7.0 software analysis About 274 distinguishable protein spots were obtained.
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