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目的探讨TGF-β3、BMP-2及地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导兔滑膜MSCs(synovial MSCs,SMSCs)成软骨分化的作用。方法取5只10~16月龄新西兰大白兔(体重1.8~2.5 kg)膝关节滑膜分离培养SMSCs,并行形态学观察、流式细胞仪检测细胞表面抗原及成脂、成骨诱导分化鉴定。采用PELLET培养系统,将聚丙烯管中的SMSCs团块分成8组,分别加入不同组合的细胞因子进行成软骨诱导培养。A组TGF-β3,B组BMP-2,C组DEX,D组TGF-β3+BMP-2,E组TGF-β3+DEX,F组BMP-2+DEX,G组TGF-β3+BMP-2+DEX,H组为对照组。通过比较各组软骨微球的直径、重量,蛋白聚糖(甲苯胺蓝染色)、Ⅱ型胶原(免疫组织化学染色)表达,以及软骨标志基因表达水平[实时定量RT-PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)]来评价各组细胞因子诱导SMSCs成软骨能力大小,确定最佳成软骨诱导细胞因子组合;并通过检测各组软骨微球DNA含量来评价软骨微球重量增加与细胞增殖的关系。结果经鉴定,成功从新西兰大白兔膝关节处滑膜分离获得SMSCs。A~F组诱导产生的软骨微球直径较小、重量较轻,Ⅱ型胶原及蛋白聚糖合成量亦较低;而G组诱导产生的软骨微球直径最大,重量最重,蛋白聚糖及Ⅱ型胶原合成量亦最多,均显著高于A~F组(P<0.05);RT-qPCR结果显示,G组软骨相关基因(SOX-9、聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原、BMP受体Ⅱ)的相对表达量显著高于其余各组(P<0.01)。各组软骨微球DNA含量随时间延长不断降低(7 d降低约70%,14 d降低约80%,21 d降低约88%)。结论 SMSCs在TGF-β3、BMP-2及DEX三者联合诱导条件下成软骨分化能力最强;软骨微球重量的增加由细胞外基质合成增多导致,而不是由细胞增殖引起。