观察再生障碍性贫血(AA)患儿骨髓间充质干细胞(MSC)体外特性及肿瘤坏死因子α诱导蛋白8-2(tumor necrosis factor-α-induced protein-8-like 2,TIPE2)在骨髓中的表达及其与γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)的关系。
方法收集2012年1月至2015年6月济南市儿童医院收治的18例AA患儿(AA组)和8例骨外伤患儿(对照组)的骨髓标本,分离、培养MSC,观察细胞形态,检测免疫表型;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测骨髓单个核细胞(MNC)中TIPE2 mRNA表达;采用酶联免疫吸附试验检测骨髓中IFN-γ、IL-6表达水平。
结果AA患儿骨髓MSC原代细胞大小形态不一,至第3代细胞长成80%融合时形态均一,呈长梭形、旋涡状分布。传至第6代开始出现老化现象。原代、P1 MSC传代时间明显延长。MSC强表达CD73、CD105、CD44、CD90,极少表达CD34、CD45、CD271。AA患儿骨髓MNC的TIPE2 mRNA表达水平为5.29±1.56,对照组表达水平为8.68±2.00,AA组明显低于对照组,差异有统计学意义(t=-4.48,P<0.01)。AA组患儿骨髓IFN-γ、IL-6水平分别为(5.48±1.97) ng/L、(5.43±1.92) ng/L,对照组分别为(3.40±1.24) ng/L、(3.79±0.92) ng/L,2组比较差异均有统计学意义(t=2.70、2.26,P均<0.05)。AA组TIPE2 mRNA表达水平与细胞因子IFN-γ、IL-6水平呈负相关关系(r=-0.838、-0.658,P均<0.05),对照组TIPE2 mRNA与IFN-γ、IL-6无相关关系(P>0.05)。
结论AA患儿骨髓MSC增殖能力减低。TIPE2作为维持免疫系统稳定重要的作用分子,其低表达可能促使炎性因子IFN-γ、IL-6的表达升高,进而对机体进行负性调控,可能在AA的发生中发挥重要作用。