【摘 要】
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为了分析单链抗体的连接肽长度对其与小分子半抗原结合力的影响,本研究以含（G4S）3连接肽的伏马菌素特异单链抗体基因H2为模板,PCR扩增获得含G4S和（G4S）2连接肽的单链抗体编码基因
【基金项目】
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国家自然科学基金(31260227,31660258);中国博士后科学基金(2015M582758XB);贵州省科技创新人才团队项目(黔科合人才团队(2015)4021);贵州省科技项目(黔科合J字[2013]2058号和黔科合LH字[2014]7092);贵州省高校优秀科技创新人才支持计划(黔教合KY字[2014]244);贵阳市科技计划项目(筑科合同[2014]37号);国家级大学生创新训
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为了分析单链抗体的连接肽长度对其与小分子半抗原结合力的影响,本研究以含（G4S）3连接肽的伏马菌素特异单链抗体基因H2为模板,PCR扩增获得含G4S和（G4S）2连接肽的单链抗体编码基因,分别命名为H2-5和H2-10,通过基因工程操作构建到p HENHi载体中,转化大肠杆菌XL1-Blue进行原核表达,纯化后利用ELISA检测单链抗体的亲和力。结果显示含不同长度连接肽的单链抗体均能在大肠杆菌中可溶性表达,单链抗体结合力与连接肽长度的关系为（G4S）3>G4S>（G4S）2,即单链抗体H2与其抗原伏马菌素的亲和力最高,其次为H2-5和H2-10抗体。因此,含有较长连接肽的单链抗体能够自身折叠形成有活性的蛋白,并表现出与小分子半抗原更强的结合能力。
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