【摘 要】
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背景:高蛋氨酸饮食可以导致ApoE-/-小鼠发生肝损伤,微小RNA(miRNA)参与细胞存活、分化和细胞凋亡等各种细胞过程,具有重要意义.目的:探讨miR-148a-5p在高蛋氨酸饮食诱导ApoE-
【机 构】
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宁夏医科大学,临床医学院,宁夏回族自治区银川市 750004宁夏医科大学,基础医学院,宁夏回族自治区银川市 750004;宁夏医科大学,基础医学院,宁夏回族自治区银川市 750004;国家卫生健康委代
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背景:高蛋氨酸饮食可以导致ApoE-/-小鼠发生肝损伤,微小RNA(miRNA)参与细胞存活、分化和细胞凋亡等各种细胞过程,具有重要意义.目的:探讨miR-148a-5p在高蛋氨酸饮食诱导ApoE-/-小鼠肝细胞凋亡中的作用.方法:12只ApoE-/-小鼠随机分为2组,每组6只,ApoE-/-对照组为普通饮食,ApoE-/-高蛋氨酸组为高蛋氨酸饮食.苏木精-伊红染色观察2组肝组织形态学变化;TUNEL染色观察肝细胞的凋亡情况;Western blot测定Bax、Bcl-2的表达改变;荧光定量PCR检测miR-148a-5p的表达;运用Target Scan靶基因预测软件预测miR-148a-5p的靶基因;双荧光素酶活性实验明确其靶向关系.结果与结论:①与对照组相比,ApoE-/-高蛋氨酸组肝脏组织肝小叶结构发生明显紊乱,部分细胞呈胞浆疏松化变性,肝细胞凋亡增加,Bax的表达明显上升且Bcl-2的表达显著下降(P<0.01);②荧光定量PCR结果显示,ApoE-/-高蛋氨酸组miR-148a-5p的表达增加(P<0.05);③靶基因预测软件提示,Bcl-2为miR-148a-5p的潜在靶基因;④双荧光素酶活性实验确定了miR-148a-5p与Bcl-2的靶向关系(P<0.05);⑤肝细胞中过表达miR-148a-5p后Bax的表达显著上升且Bcl-2的表达明显下降(P<0.01);⑥提示在高蛋氨酸饮食诱导的ApoE-/-小鼠肝细胞中,miR-148a-5p通过负调控Bcl-2促进肝细胞凋亡,这可能是造成肝损伤的机制之一.
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