【摘 要】
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目的分析p16INK4a及Fas在椎间盘细胞中的功能作用,探讨椎间盘退变的机制。方法利用p16INK4a及Fas特异性短链干扰RNA(siRNA)转染体外培养的内破裂(IDD)及突出(LIDP)椎间盘细胞
【机 构】
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解放军总医院第一附属医院骨科; 解放军总医院第一附属医院骨科; 北京大学医学部基础医学院解剖学与组织胚胎学系;
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目的分析p16INK4a及Fas在椎间盘细胞中的功能作用,探讨椎间盘退变的机制。方法利用p16INK4a及Fas特异性短链干扰RNA(siRNA)转染体外培养的内破裂(IDD)及突出(LIDP)椎间盘细胞。观察p16INK4a及Fas表达的沉默情况。分析视网膜母细胞瘤(Rb)蛋白磷酸化状态、β-半乳糖苷酶(β-gal)染色阳性率、细胞形态和增殖的变化;放射性同位素标记培养细胞,观察细胞合成氨基葡聚糖(GAG)及核心蛋白的变化。结果p16INK4a及Fas特异性siRNA分别有效地沉默了椎间盘细胞内p16 INK4a及Fas表达。p16INK4a表达沉默使退变椎间盘细胞衰老表型及合成能力得以明显改善;Fas特异性siRNA转染的LIDP椎间盘细胞的生理功能有所恢复,但未及正常水平,而转染的IDD椎间盘细胞的功能无明显变化。结论p16INK4a基因介导的细胞衰老是椎间盘退变的一个关键启动因子。
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