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目的 建立一种检测血清中极长链脂肪酸的LC-MS/MS方法.方法 收集2009年4-6月35份疑似ALD患者血清样本,采用LC-MS/MS方法检测血清中极长链脂肪酸含量.分析加样回收率、精密度及准确度,研究在常温放置和反复冻融条件下血清样本中极长链脂肪酸含量的稳定性.同时,用该方法测定101份健康人血清中极长链脂肪酸含量,统计测定值并进行分析.随机抽取35份血清,测定结果与德国柏林医学诊断检验中心(MDI)实验室测定数值进行比对.结果 血清样本中的极长链脂肪酸在梯度洗脱条件下分离良好,杂质干扰程度小.山萮酸(behenate,C22:0)的线性范围为2～64 mg/L,加样回收率为99.92%～102.05%,日内RSD≤6%,日间RSD≤9%;木焦油酸(tetracosanoicacid,C24:0)线性范围为2～64 mg/L,加样回收率为95.12%～100.44%,日内RSD≤6%,日间RSD≤7%;蜡酸(hexacosanoic acid,C26:0)线性范围为0～8 mg/L,加样回收率为92.21%～103.71%,日内RSD≤7%,日间RSD≤8%.山萮酸、木焦油酸和蜡酸的准确度均在85%～115%之间.样本在常温条件下放置12 h、反复冻融10次可以保持稳定.检测101份健康人血清中极长链脂肪酸含量服从正态分布,山萮酸含量为(19.43±4.43)mg/L,木焦油酸含量为(19.10±4.58)mg/L,蜡酸含量为(0.21±0.11)mg/L,计算木焦油酸/山萮酸和蜡酸/山箭酸比值分别为(0.99±0.13)和(0.01±0.01).统计结果显示,成年人血清中蜡酸(0.18±0.10)mg/L和木焦油酸/山萮酸比值(1.01±0.10)和未成年人血清中蜡酸(0.21±0.08)mg/L和木焦油酸/山萮酸比值(0.99±0.14)差异无统计学意义(t分别为1.439、0.806,P均＞0.05);男性健康人血清中木焦油酸/山萮酸比值(1.05±0.10)与女性健康人血清中木焦油酸/山萮酸比值(0.97±0.10)差异有统计学意义(t=3.394,P=0.001).与德国MDI实验室比对结果发现,本研究测定的山萮酸含量(16.93±4.30)mg/L和木焦油酸含量(19.57±6.40)mg/L与德国MDI实验室测定的山萮酸含量(13.85±3.17)mg/L和木焦油酸含量(16.10±5.84)mg/L差异有统计学意义(t分别为8.401和9.914,P均=0.000),而本研究测定的蜡酸含量(0.68±0.48)mg/L、木焦油酸/山萮酸比值(1.20±0.40)和蜡酸/山萮酸比值(0.04±0.04)与德国MDI实验室测定的蜡酸含量(0.65±0.67)mg/L、木焦油酸/山萮酸比值(1.19±0.43)和蜡酸/山萮酸比值(0.05±0.05)差异无统计学意义(t分别为0.372、0.317、0.945,P均＞0.05).结论 应用LC-MS/MS方法检测血清中极长链脂肪酸,具有较好的准确度和灵敏性,特异性强,稳定性好,能为临床诊断提供重要的生化依据.