【摘 要】
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目的 观察不同病程糖尿病大鼠视网膜血管细胞线粒体DNA (mtDNA)损伤及黏附分子表达、细胞凋亡情况.方法 Sprague-Dawley大鼠100只,分为正常对照组和实验组.实验组大鼠腹腔注
【机 构】
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南昌大学第二附属医院眼科,中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室,南京医科大学附属南京一医院眼科
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目的 观察不同病程糖尿病大鼠视网膜血管细胞线粒体DNA (mtDNA)损伤及黏附分子表达、细胞凋亡情况.方法 Sprague-Dawley大鼠100只,分为正常对照组和实验组.实验组大鼠腹腔注射链尿佐菌素诱导糖尿病模型,造模成功后依照病程分为DR1、DR2、DR3月组,正常对照组分为NR1、NR2、NR3月组.提取各组大鼠视网膜血管DNA,联合Fpg酶切Southern印迹杂交检测未损伤mtDNA含量；实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察mtDNA编码基因环氧酶-1(COX-1)及转录因子A(mtTFA)mRNA的表达；消化铺片TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)免疫荧光、细胞间黏附因子(ICAM-1)免疫组织化学染色,分别观察细胞凋亡及黏附分子的表达.结果 不同病程糖尿病大鼠视网膜未损伤mtDNA含量与不同鼠龄正常对照组比较,糖尿病大鼠未损伤mtDNA含量明显减少,且随着病程延长减少更明显；COX-1及mtTFA mRNA表达相应降低；糖尿病大鼠随病程延长,TUNEL、ICAM-1阳性细胞数增多.结论 糖尿病大鼠随着病程延长,视网膜血管细胞mtDNA损伤加重,其编码基因及转录调控基因mRNA的表达均相应下降,黏附分子表达上调,细胞凋亡增加.
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