【摘 要】
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目的构建结核杆菌低分子质量抗原Mtb8.4的原核表达质粒,并检测其在大肠杆菌中的表达.方法 PCR扩增目的基因,克隆到质粒pET-His T7启动子的下游;酶切和PCR法鉴定重组子;阳性重
【机 构】
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温州医学院附属第二医院儿内传染科,四川省泸州医学院附属医院传染科,温州市第三人民医院ICU
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目的构建结核杆菌低分子质量抗原Mtb8.4的原核表达质粒,并检测其在大肠杆菌中的表达.方法 PCR扩增目的基因,克隆到质粒pET-His T7启动子的下游;酶切和PCR法鉴定重组子;阳性重组子转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳分析. 结果重组质粒pET-His-Mtb8.4成功构建,含阳性重组子的菌体蛋白经SDS-PAGE电泳出现一新的蛋白带,与预计相符.结论初步证明构建的大肠杆菌重组体能够表达目的蛋白,为进一步对其免疫效应的研究奠定了基础.
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